Karyotyyppi: sytogeneettinen tutkimus ja sen tulokset

Karyotyyppi on joukko kaikista kromosomeista, jotka löytyvät jokaisen niitä sisältävän somaattisen solun ytimestä, ja niiden lukumäärä ja rakenne ovat ominaisia ​​jokaiselle lajille. Karyotyypitesti on eräänlainen sytogeneettinen testi, jonka avulla voidaan havaita poikkeavuuksia lukumäärässä (kromosomaaliset numeeriset poikkeamat) ja kromosomien rakenteessa (kromosomaaliset rakenteelliset poikkeamat).

Karyotyyppi sisältää täydellisen kromosomipaketin, joka on yksilöllinen henkilölle. Kromosomit ovat rakenteita, jotka on valmistettu DNA: sta ja proteiineista, ihmiskehon jokaisessa ydintetyssä solussa on 46 kromosomia, mukaan lukien 22 autosomiparia, ja 1 pari heterosomeja, ts. Sukupuolen määrittävät kromosomit.

Karyotyypitesti on sytogeneettinen testi, jonka avulla voidaan havaita poikkeavuuksia kromosomien lukumäärässä (kromosomaaliset numeeriset poikkeamat) ja rakenteessa (kromosomaaliset rakenteelliset poikkeamat).

Karyotyyppisi tunteminen on erityisen tärkeää ihmisille, jotka yrittävät saada lapsia pitkään ja epäonnistuneesti (jolloin molempien kumppaneiden tulisi tehdä ne), naisille, jotka ovat kokeneet keskenmenoja monta kertaa, tai niille, jotka ovat synnyttäneet kuolleen lapsen, sekä ihmisille, jotka kärsivät geneettisistä sairauksista kromosomipoikkeavuudet aiheuttavat fenotyyppisten ominaisuuksien perusteella tehdyn diagnoosin vahvistamiseksi.

Sisällysluettelo:

1. Normaali kariotyyppi
2. Karyotyyppi: tutkimuksen tarkoitus
3. Indikaatiot kariotyypin määrittämiseksi ja testaamiseksi
4. Karyotyyppi: tutkimuksen materiaali
5. Kuinka karyotyyppi seulotaan?
6. Karyotyypin tulosten esittely
7. Karyotyyppi: testin aika ja hinta

Normaali kariotyyppi

Ihmisen normaali karyotyyppi koostuu 46 kromosomista, joista 23 periytyy äidiltä (tämä on naaraspuolisen sukusolusolun ydin - munasolu) ja 23 isältä (sisältyy urospuolisen sukusolun ytimeen - siittiöön).

Kromosomijoukkojen joukossa on 22 autosomiparia (vastuussa kaikkien ominaisuuksien perinnöstä ja välityksestä paitsi sukupuoleen liittyvistä) ja 1 pari heterosomeja (vastuussa sukupuoleen liittyvien ominaisuuksien perinnöstä).

Karyotyyppi kuvataan numeroilla, jotka edustavat kromosomien kokonaismäärää somaattisessa solussa, ja isoilla kirjaimilla X ja Y, jotka edustavat sukupuolikromosomeja.

Normaalia naaraskaryotyyppiä kuvataan nimellä 46, XX (siten, se koostuu 46 kromosomista, joista 2 X-kromosomia ovat sukupuolen määritteleviä kromosomeja) ja normaalia urospuolista karyotyyppiä kuvataan 46, XY (vastaavasti se koostuu 46 kromosomista ja sukupuoli on määritetään kahdella heterosomilla, X ja Y).

Karyotyyppi: sytogeneettisen testin tarkoitus

Sytogeneettinen tutkimus ja karyotyypitys suoritetaan sen tarkistamiseksi, onko potilaan kromosomien lukumäärä ja rakenne oikea. Kromosomien lukumäärän poikkeavuuksia kutsutaan kromosomipoikkeamiksi, joista erotetaan seuraavat:

• numeeriset kromosomipoikkeamat

Normaalin morfologian omaavien kromosomien lukumäärän poikkeavuudet johtuvat yleensä epänormaalista solujen jakautumisesta. Erottuu:

• Polyploidisolut (euploidisolut), joille on tunnusomaista lisääntyneille soluille tyypillinen haploidikromosomien (1n = 23 kromosomi) moninkertainen määrä, esim. Triploidisolut (3n = 69 kromosomia; kariotyyppi 69, XXY), tetraploidit (4n = 92 kromosomia; kariotyyppi 92) , XXXY). Tällaiset poikkeamat eivät ole yleisiä, ja ihmisillä ne ovat yleensä tappavia
  
  
• Aneuploidisolut, jolle on tunnusomaista lisääntynyt tai vähentynyt yhden rakenteen omaavien kromosomien määrä. Tällaiset poikkeamat voivat vaikuttaa sekä autosomeihin että sukupuolta määrittäviin kromosomeihin. Esimerkkejä epänormaalin määrän kromosomien aiheuttamista taudin oireyhtymistä soluissa ovat:
  - monosomia - Turnerin oireyhtymä 45, X0 (yksi sukupuolikromosomi puuttuu)
  - trisomia - Downin oireyhtymä 47, XX, +21 tai 47, XY, +21 (lisäkromosomi parissa 21)

• Rakenteelliset kromosomipoikkeamat

Ne ovat kromosomirakenteen häiriöitä, joiden lukumäärä somaattisessa solussa on oikea. Yleisimpiä ovat:

• deleetio (kromosomivarren fragmentin menetys)
• päällekkäisyys (tietyn kromosomivarren fragmentin kaksinkertaistaminen)
• insertio (toisen kromosomin lisäfragmentin sijoittaminen kromosomin lyhyeen tai pitkään haaraan)
• kääntö (kromosomivarren osan kääntäminen 180 astetta)
• translokaatio (kromosomivarren osan siirtäminen toiseen kromosomiin)
• rengaskromosomit (muodostuvat, kun yksi tai useampi kromosomi rikkoutuu ja kiinnittyy uudelleen)

Indikaatiot kariotyypin määrittämiseksi ja testaamiseksi

Sytogeneettiset testit ja kariotyypitys suoritetaan aikuisilla, raskaana olevilla naisilla ja lapsilla. Tällaiselle diagnostiikalle on monia merkkejä, erityisesti:

• Lisääntymishäiriö

- pariskunnan hedelmättömyys (määritelty olemaan raskaana huolimatta säännöllisestä yhdynnästä 3-4 kertaa viikossa vähintään yhden vuoden ajan ilman minkäänlaista ehkäisyä)
- toistuvat keskenmenot ja vaikeudet raskauden ylläpitämisessä
- kuolleena syntynyt
- synnyttää lapsi, jolla on geneettisesti määritelty sairaus, joka liittyy kromosomien lukumäärän tai rakenteen poikkeavuuksiin
- kariotyypin tutkiminen kumppaneissa, jotka haluavat in vitro -hedelmöityksen

• Geneettinen synnytysdiagnoosi on osoitettu onnettomuudessa

- äidin korkea ikä (yli 35-vuotiaat naiset) raskauden aikana
- poikkeavuudet kromosomien määrässä tai rakenteessa lapsen tai sisarusten vanhemmilla
- epänormaalit tulokset sikiön kuvantamisen ei-invasiivisista tekniikoista, jotka perustuvat sikiön kuvantamiseen ultraäänellä, mikä saattaa osoittaa lisääntynyttä riskiä sikiön kromosomaalisista poikkeamista (lisääntynyt kohdunkaulan läpikuultavuus, nenän luun kehityshäiriöt)

• Kromosomipoikkeavuuksien aiheuttamien sairauksien diagnoosi

- potilaalla on fenotyyppisiä piirteitä, jotka osoittavat tietyn kromosomaalisen oireyhtymän tai dysmorfisten ominaisuuksien diagnoosin vahvistamiseksi
- kromosomaalisten poikkeamien aiheuttamat sairaudet välittömässä perheessä

• Sukupuolen erilaistumishäiriöt

- ulkoisten sukupuolielinten epänormaali rakenne tekee vastasyntyneen sukupuolen selkeän määrittämisen mahdottomaksi
- ei merkkejä sukupuolisesta kypsymisestä

Karyotyyppi: tutkimuksen materiaali

Testimateriaali on yleensä:

• Perifeeriset laskimolymfosyytit
  
  
• Amniosyytit, jotka ovat sikiön kuorittuja soluja, jotka löytyvät raskaana olevan naisen lapsivedestä. Heidän tutkimuksensa avulla voidaan määrittää sikiön karyotyyppi. Amnioninesteen kerääminen (lapsivesitutkimus, lapsivesitutkimus) suoritetaan erikoistuneissa keskuksissa erityisen koulutetun gynekologin toimesta ultraäänilaitteiden valvonnassa. Se koostuu pistävän neulan asettamisesta äidin vatsaseinän läpi lapsivesiön ja 15-20 ml: n lapsiveden keräämisestä. Se on invasiivinen testi, jolla on monia komplikaatioita, mukaan lukien raskauden menetys, sukupuolielinten havaitseminen, lapsiveden vuotaminen sekä kohdunsisäinen infektio, kohdunsisäinen kuolema tai pistosneulavaurio. Ne voidaan suorittaa 15-20 viikon raskauden aikana.
  
  
• Solut kerättiin kuorionvillanäytteenoton aikana
  
  
• Kuorionvillanäytteenotto suoritetaan 9. ja 12. raskausviikon välillä. Se on invasiivinen testi, jolla on monia komplikaatioita, samanlainen kuin lapsivesitutkimus.
  
  
• Sikiön verisolut kerääntyivät koodrocentesis-prosessin aikana
  
  
• Kordocentesis, eli napanuoran puhkaisu pistoneulalla tiukassa ultraäänitarkastuksessa. Se suoritetaan 16. raskausviikon jälkeen sikiön veren keräämiseksi tutkimusta varten. Se on invasiivinen testi, joka suoritetaan harvoin, ja siihen liittyy monien komplikaatioiden mahdollisuus, samanlainen kuin lapsivesitutkimuksen ja korionihuksen näytteenotto.
• Fibroblastit, jotka on saatu kudosviljelmällä
  
  
• Syöpäkasvaimista peräisin olevat solut

Kuinka karyotyyppi seulotaan?

Koko kromosomipaketti voidaan testata testaamalla mikä tahansa kehon ydinsolu, mutta yleisimmät testit ovat ääreisveren lymfosyytit.

Näyte pienestä määrästä potilaan laskimoperifeeristä verta kerätään vakiona verikokeita varten, kuten täydellinen verenkuva. Potilaan valmistelua tutkimukseen ei tarvita, se voidaan suorittaa milloin tahansa päivästä, eikä potilaan tarvitse olla tyhjässä vatsassa.

Sytogeneettisen testin suorittamiseksi on välttämätöntä saada verinäytteestä lymfosyytit, jotka on estetty sopivassa solunjakautumisvaiheessa (mitoosi) - metafaasi. Tätä tarkoitusta varten soluja viljellään in vitro. Kun käytetään solujen jakautumisen stimulaattoreita, niitä stimuloidaan lisääntymään.

Kun solut saavuttavat mitoottisen metafaasin vaiheen, annetaan erityistä ainetta estämään lisääntymisprosessi mitoosin valitussa vaiheessa. Metafaasivaiheessa kromosomit ovat kehittyneimpiä ja helpoin tapa analysoida niitä yksityiskohtaisesti. Seuraava vaihe kariotyyppitestissä on kromosomien värjäys, jotta saadaan kromosomille tyypillinen raitakuvio.

Tämän perusteella analysaattori pystyy tunnistamaan vastaavat kromosomit ja jakamaan ne homologisiksi pareiksi. Kromosomien lukumäärän ja rakenteen analysointi on mahdollista erikoistuneiden laitteiden, tarkan valomikroskoopin ja tietokoneohjelmien avulla.

Karyotyypin tulosten esittely

Saadut ja värjätyt kromosomit on tunnistettava ja jaettava vastaaviin homologisiin kromosomipareihin, jotka on merkitty numeroilla 1 - 22. Niiden tunnistaminen on mahdollista kullekin kromosomille ominaisen yksittäisten parien raitojen järjestelyn ansiosta. Heterosomit tai sukupuolikromosomit on merkitty kirjaimilla X ja Y.

22 kromosomiparin ja 1 autosomiparin graafista jakaumaa kutsutaan karyogrammiksi. Sen suorittamiseksi on tarpeen ottaa mikrovalokuva erityisen värjätyistä kromosomeista, jotka on pysäytetty mitoottisen metafaasin vaiheessa. Saadut kromosomit leikataan valokuvista ja järjestetään homologisiksi pareiksi niiden koon, sentromeerin sijainnin ja raitakuvioiden mukaan.

Karyotyyppi: testin aika ja hinta

Sytogeneettisen testin suorittaminen ja kariotyypin kehittäminen kestää yleensä 2 - 4 viikkoa, koska testisolujen in vitro -viljelmän perustaminen ja solujen jakautumisen lopettaminen vaaditaan sopivassa vaiheessa.

Potilaan karyotyyppi voidaan määrittää sekä yksityisesti sytogeneettisessä laboratoriossa että kansallisen sairauskassan korvaamana.

Yksityisissä olosuhteissa tehdyn testin kustannukset vaihtelevat noin 500 PLN: n välillä ja voivat vaihdella hieman laboratoriosta riippuen, missä se suoritetaan.